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人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞

一、產(chǎn)品簡介

1. 產(chǎn)品名稱:人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞

2. 組織來源:胎盤組織

3. 產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4. 人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞簡介:

人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后,在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起,以細(xì)胞滋養(yǎng)層為中軸,外裹合體滋養(yǎng)層,稱初級(jí)干絨毛。胚外中胚層長入初級(jí)干絨毛的中軸,使初級(jí)干絨毛變成了次級(jí)干絨毛。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織,并與胚體內(nèi)的血管相通時(shí),次級(jí)干絨毛改稱三級(jí)干絨毛。三級(jí)干絨毛末端的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞形成細(xì)胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育,叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤,而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。 明舟生物生產(chǎn)的人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞采用胰蛋白酶-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-7免疫熒光鑒定,純度可達(dá)85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5. 培養(yǎng)基信息:

DMEM-F12FBS、EGFbFGF、InsulinPenicillin、Streptomycin

我們推薦使用人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞專用完全培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞的培養(yǎng)基。

二、人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三、使用方法

在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,此細(xì)胞不建議傳代,請(qǐng)您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

客戶收到人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞傳代

1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4) 細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

四、注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請(qǐng)注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

5. 細(xì)胞只可用于科研。

 

備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考

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