| 產品名稱 |
人羊膜上皮細胞 |
| 商品貨號 |
MZ-4220 |
| 組織來源 |
人羊膜組織，于原代凍存 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細胞描述 |
人羊膜是由上皮細胞層，基底膜和無血管基質組成。羊膜上皮細胞是在受精后的第8天由外胚層形成。由于其為胚胎來源，羊膜上皮細胞缺少主要的組織相容性抗原，這點已用于異基因移植來治療病人的溶酶體疾病。研究表明，羊膜上皮細胞具有多種功能，例如：合成和釋放乙酰膽堿和兒茶酚胺，同時，表達編碼多巴胺受體和多巴胺轉運蛋白的信使RNA。它們表達神經元和神經膠質細胞的標記物并形成基本的纖維母細胞生長因子，肝細胞生長因子和β轉運生長因子。人類羊膜上皮細胞被認為是研究多巴胺釋放和攝取過程、受體信號轉導和開發(fā)作用于這些受體的新藥物的合適的人的細胞模型。 |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
